TINCIÓN SUPRAVITAL CON AZUL DE METILENO
Materiales necesario:
.- Microscopio.
.- Portaobjetos y cubreobjetos.
.- Tubos de hemólisis.
.- Pipetas Pasteur.
,. Papel parafilm.
Reactivos:
.- Azul de metileno nuevo
.- Oxalato potásico.
.- Agua destilada
Muestra:
.- Sangre capilar fresca o venosa anticoagulada.
Técnica:
1. Preparamos el colorante de la siguiente manera:
Azul de metileno nuevo 0,5 g.
Oxalato potáxico 1,6 g.
Agua destilada c.s.p. 100 ml.
2. Hechamos 2 gotas de sangre y dos de colorante (proporción 1:1) en un tubo de hemólisis.
3. Tapamos el tubo con parafilm y dejamos la mezcla en reposo, a temperatura ambiente, durante 10 minutos.
4. Al cabo de ese tiempo extraemos del tubo una o dos gotas de la mezcla y la depositamos sobre un portaobjetos.
5. Cubrimos la mezcla con un cubreobjetos.
6. Observamos la preparación resultante al microscopio óptico con el objetivo de 40 x.
Lectura de resultados:
.- Podemos apreciar los núcleos celulares teñidos a diferencia de los vistos en la preparación de sangre fresca (práctica III).
HOJA DE TRABAJO:
1º .- ¿En qué se diferencia una tinción vital de una supravital?
Las tinciones vitales consisten en la introducción de un colorante en la circulación de un organismo vivo, y las tinciones supravitales, que emplean el colorante sobre células o tejidos vivos aislados del organismo.
2º.- ¿Cuáles son los colorantes vitales más utilizados?
Son el rojo neutro, que tiñe fundamentalmente los gránulos citoplasmáticos, el verde Jano, que tiñe mitocondrias y otros orgánulos celulares, y el azul de metileno, que tiñe núcleos y algunas extructuras celulares.
3º.- ¿Qué tipo de estructuras tiñe selectivamente el verde Jano?
El verde Jano, tiñe mitocondrias y otros orgánulos celulares
4º.- ¿Cuáles son las ventajas de una tinción supravital?
Que emplean el colorante sobre células o tejidos vivos aislados del organismo.
5º.- ¿Cuáles son los inconvenientes?
Que la observacion microscópica debe de ser rápida ya que las células no pertenecen vivas mucho tiempo.
