TINCIÓN DE WRIGHT
METÓDICA
Extracto de las técnicas de tinción hematológica de la casa Panreac.
Fundamento
El colorante utilizado es una solución de eosina y una mezcla de azul de metileno (DEL 50 AL 75%) y azur B (del 10 al 25%) junto con otros derivados del alcohol metílico.
Dada la presencia de metanol en la composición del colorante, no es necesario un paso previo de fijación antes de la coloración.
Solo si se van a guardar las extensiones sin teñir de un día para otro procederemos a su fijación para evitar el deterioro del frotis.
Material necesario
- Microscópio óptico.
- Cristalizador.
- Puentes de tinción.
- Pipetas Pasteur con chupete.
- Frasco lavador.
- Guantes.
- Tubos de ensayo.
Reactivos
- Solución de eosina-azul de merileno según Wright.
- Solución tampón pH 7,2.
- Aceite de inmersión.
Sangre capilar fresca o venosa anticoagulada. Los anticoagulantes más adecuados son la heparina y el EDTA.
Técnica
- Realizar un frotis sanguíneo muy fino.Dejar secar al aire.
- Sobre la extensión colocada horizontalmente en el puednte de tinción verter 1 ml de eosina-azul de metileno. Dejamos actuar 1 minuto y lavamos con solución tampón pH 7,2. Dejamos escurrir y secar en posición vertical.
- Inmediatamente antes de su empleo y en un tubvo de ensayo, diluimos 0,5 ml de eosina-azul de metileno con 0,5 ml de solución tampón pH 7,2 . Meclamos bien y cubrimos con esta dilución la extensión. Teñimos durante 3-5 minutos y lavamos con agua del grifo. Volvemos a lavar con solución tampón pH 7,2. Dejamos escurrir y secar en posición vertical.
Lectura de resultados
Depositamos una gota de aceite de inmersión y observamos con el objetivo de 100 x.
Las células se observan coloreadas de la misma manera que con la tinción de Giemsa.
HOJA DE TRABAJO
1º. ¿Qué tipo de colorante utilizamos en esta tinción?
Solución de eosina-azul de metileno según Wright.
2º. ¿Que sustancia utilizamos como fijador?
Solución tampón pH 7,2.
3º. ¿Cuánto tiempo debe estar en contacto el frotis con el colorante diluido?
Durante 3-5 minutos.
