RECUENTO DE HEMATÍES Práctica XIII del libro 21/11/14

RECUENTO DE HEMATÍES

INTRODUCCIÓN

El recuento de hematíes o RBC ( Red Blood Count) consite en la determinación del número de eritrocitos presentes en un volumen determinado de sangre (generalmente, en 1 mm3 o microlitro).


METÓDICA

Fundamento

 Para el recuento en cámara de glóbulos rojos, se diluye la sangre problema en un líquido apropiado y posteriormente se deposita en la cámara de recuento, donde se cuentan células presentes en algunos cuadrados de uno de los retículos.

Material necesario

• Una pipeta diluidora de Thoma, para recuento de glóbulos rojos.
• Un tubo de goma con boquilla, adaptable a la pipeta diluidora.
• Una cámara de recuento, con un retículo tipo Neubauer mejorado.
• Un cubre (hay unos cubres especiales para su uso en recuentos con cámara).
• Un microscopio.

Reactivos

• Líquido de dilución. Éste debe de ser isotónico con el plasma, para evitar la alteración morfológica e incluso la lisis de los hematíes.

El más utilizado es el de Hayem, que se compone de las siguientes sustancias:

-2,5 g de sulfato sódico.
-0,5 g de cloruro sódico.
-0,25 g de cloruro mercúrico.
-100 ml de agua destilada.

Si contiene precipitados, antes de usarlo deberá ser filtrado.

Muestra

• Sangre capilar obtenida por punción del pulpejo de un dedo, o sangre venosa procedente de una punciòn venosa y anticoagulada con EDTA.

Técnica

1. Situar un cubre sobre el retículo de la cámara. Para facilitar su adhesión a ésta, se ejerce una ligera presión al tiempo que se desliza el cubre sobre las bandas laterales, previamente humedecidas con H2O, de su porción central.
2. Aspirar la sangre hasta la señal de 0,5 ( si se cree que puede haber una policitemia) o hasta la de 1 ( si se piensa que puede existir una anemia).
3. Limpiar cuidadosamente el exterior de la pipeta con un algodón.
4. Aspirar líquido diluyente hasta la señal de de 101.
5. Quitar el tubo de goma y homogeneizar el contenido moviendo la pipeta con cuidado durante 2 o 3 minutos.
6. Desechar las tres primeras gotas y depositar la cuarta entre la cámara y el cubre.
7. Dejar reposar la sangre unos minutos para qie las células presentes puedan sedimentarse.
8. enfocar el retículo con el objetivo de 40 x y verificar que la distribución de los hematíes es homogénea.
9. Contar  los hematíes presentes en 80 cuadros pequeños del cuadro grande central, esto se logra contando los 4 cuadros medianos de las esquinas y en el del centro.,  solo se cuentan los hematíes contenidos dentro del cuadro y los que están en contacto con las líneas de demarcación superior o derechas y se sigue un orden en zig-zag.

Lectura de resultados

    Como se cuentan los hematíes en 5 cuadrados medianos del cuadrado grande central, y éste tiene 25 cuadrados medianos, hay que multiplicar por 5 la cifra obtenida en el recuento, para calcular el número de hematíes que hay en un cuadrado grande.

     Como la longitud de cada uno de los lados del cuadrado grande central es de 1 mm, y la longitud del espacio comprendido entre éste y el cubre es de 0,1 mm, hay que multiplicar x10 el resultado anterior, para determinar así el número de hematíes existentes, no en 0,1 mm3, sino en 1 mm3.

    Como la sangre, previamente al recuento propiamente dicho, se diluye, hay que multiplicar el resultado anterior x100, si se ha partido de la sangre entera contenida hasta el enrase de 1, o por 200, si se ha partido de la sangre entera contenida hasta el enrase de 0,5 (para calucular las diluciones realizadas no se tiene en cuenta el líquido contenido en el tubo capilar largo de la pipeta luidora, pues se considera que éste no se mezcla con el resto a nivel del bulbo).

    En definitiva, para su cálculo puede emplearse la siguiente fórmula:

                                                             RBC  = H x 5 x 10 x D.

RBC = recuento de hematíes (número de hematies por mm3 de sangre)

H = hematíes contados en 5 cuadrados medianos

D = factor de dilución (100 o 200)

El margen de error de esta técnica es alto ( un   + 20 %).

              RBC = 1050 X 5 X 10 X 100
              RBC = 5.250.000 / MM3

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS

La disminución del RBC se produce en las anemias y su aumento se da en la policitemias.

Se considera normal un RBC comprendido entre los 4 y los 5,5 millones/mm3 en las mujeres, y entre los 4,5 y los 6 millones/mm3 en los varones.

Hoja de trabajo

    1º. ¿ Qué se debe hacer si el líquido de Hayen contiene precipitados?
          Hay que filtrarlo.
    2º. ¿Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadrados pequeños donde se han contado los hematíes?
          0,5 x 0,5 x 0,1 = 0.0025 mm3.
    3º. ¿Cuál es el volumen de sangre diluida que hay sobre cada uno de los cuadrados medianos donde se han contado los hematíes?
          0,20 x 0,20 x 0,1 = 0,004 mm3.
    4º. ¿Cúal es el volumen de sangre diluida que hay sobre el cuadrado central?
          1 x 1 x 0,1 = 0,1 mm3.
    5º. Si la pipeta de Thoma se enrasa con sangre hasta la señal de 1, ¿cuál es la dilución posteriormente obtenida?
          Sería de 1/100.
    6º. Si la sangre se diluye a 1/200 y se cuentan 450 hematíes en 5 cuadrados medianos ¿cuál es el RBC obtenido?.
          RBC = 450 x 5 x 10 x 200
          RBC =  4.500.000 hematies/mm3.

Resultados obtenidos

Hematíes contados en 5 cuadrados medianos:  1.050.
Factor de dilución:   100.
RBC: 5.250.000 hematies/mm3

Valoración de los resultados

Sexo de la persona que pertenece la sangre:
Puede ser hombre o mujer, ya que esta dentro del rango de los 2.

El RBC obtenido es:
Normal.