DETERMINACIÓN DE UN Du. Práctica LXII del libro, pag 581, 20-05-2015

DETERMINACIÓN DE UN Du

Fundamento:  

 

Realizar la prueba de Coombs indirecta, para observar en la sangre problema si existe un antígeno D débil (Du)
Material:   

• tubos de centrífuga, 
• centrífuga, 
• pipetas pasteur, 
• gradilla, 
• baño de agua,reloj

Reactivos:  

• Suero Anti-D,
• suero de Coombs,
• suero fisiológico

Muestra:

• Hematíes de la sangre problema en suspensión al 5%

Técnica: 
1.-En un tubo, añadimos una gota de suero anti-D y una gota de la suspensión de hematíes al 5% y lo mezclamos suavemente
2.-Incubamos el tubo a 37ºC durante 30-45 minutos.
3.-Después de incubar realizamos lavado de los hematíes, de la siguiente manera:

• En el tubo añadimos suero fisiologico (unos 4 ml) y añadimos en otro agua destilada para compensar.
• Centrifugamos el tubo a 2.000 rpm durante 4 minutos
• Después de centrifugar, retiramos el sobrenadante
• Repetimos el proceso dos veces mas
• Decantamos por completo el sobrenadante final.

4.-Añadimos sobre el sedimento hemático una gota de suero de Coombs y mezclamos suavemente.

5.-Centrifugamos el tubo a 1.000 rpm durante 1 minuto
6.-Observamos si existe aglutinación
Observaciones:  

Para evitar falsos positivos (si existe aglutinación) debido a una sensibilización de los hematíes in vivo, debemos realizar una prueba de Coombs directa con los hematíes del problema. Este nos servirá como control negativo.
Resultados: 

Interpretación de los resultados:   

Si aglutina el resultado es positivo, por lo tanto la sangre problema contiene el antígeno Du. En caso de no salir aglutinación el Rh será negativo. En nuestro caso los hematíes no han aglutinado, por lo tanto nuestra sangre problema es Rh negativo.
Hoja de trabajo
1.¿Qué contiene el suero de Coombs? El suero de Coombs contiene anticuerpos antiglobulina humana
2.¿Qué se detecta con la prueba directa? Detectamos anticuerpos incompletos que han sensibilizado los hematíes in vivo
3.¿Qué podemos detectar con la prueba indirecta? Detectamos anticuerpos incompletos libres en el suero, o poner de manifiesto la presencia de antígenos débiles en la membrana de los hematíes
4.¿Qué buscamos en la sangre del paciente? Buscamos si puede tener un antígeno D débil
5.¿Qué ocurre si el control es positivo? Ha habido una sensibilización prévia de los hematíes in vivo, por lo que los resultados no son válidos.

Determinación rápida de hemoglobina

Fundamento

Esta determinación rápida de HB se basa en el hecho de que una sangre una concentración HB superior a la permitida para poder efectuar una relación tiene una densidad mayor a la de la solución de sulfato de cobre previamente preparada por lo que en esta circunstancia una gota de la sangre investigada que libremente a través de la solución de sulfato de cobre

Material necesario

• Material de extracción de sangre capilar
• Un vaso de precipitado de 50 mililitros

Reactivos

1º Solución de sulfato de cobre a una densidad de 1, 052 gr/dl  para mujeres y 1,054 para hombres gr/dl.

Para ello lo hacemos de la siguiente forma primero y sobre 17 gramos de sulfato de cobre en 100 mililitros de agua destilada solución madre.

2º Mezclar 51 ml de la solución madre con 49 ml de agua destilada.

Muestra

• sangre capilar

Técnica

1.  Disponer la solución de sulfato de cobre en un vaso de precipitado de 50 mililitros
2.  Recoger una gota de la sangre problema
3. Dejar caer la gota de la sangre problema con algo de impulso sobre la solución de sulfato de cobre

Lectura de resultados

Si la gota de sangre problema es más densa que la solución de sulfato de cobre que libremente a través de ella.

Sin embargo si la gota de sangre problema es menos densa que la solución de sulfato de cobre no caer al fondo del vaso de precipitados que contiene esta solución.

Interpretación de los resultados

Una gota de sangre con más de 12 gr/dl de HB tiene una densidad mayor que 1, 052 gramos/cm3.

Si la gota de sangre problema cae libremente a través de la solución de sulfato de cobre tiene una densidad mayor que 1,52 gramos por centímetro cúbico y por lo tanto tiene una concentración de HB superior a 12 gramos por decilitro.

Si la sangre problema tiene una concentración de HB superior a 12 gramos por decilitro el sujeto puede donar sangre.

En el caso contrario la donación no puede ser efectuada.

Hoja de trabajo

1¿Cuál es el valor mínimo de hemoglobina que debe tener una mujer antes de la donación?  12,5 g/dl en mujeres.
2. ¿Con qué otra solución comparamos la densidad de la sangre? Con solución de sulfato de cobre.