DETERMINACIÓN DEL GRUPO Rh EN TUBO
Fundamento
Determinar el grupo Rh de la muestra enfrentándolo al suero anti-D
Material
Material
Tubos de centrífuga, pipetas pasteur, centrífuga, rotulador de vidrio, gradilla, vasos de precipitado,visualizador luminoso
Reactivos
Reactivos
- Suero anti-D
- Albúmina bovina al 30%
- Suero fisiológico
Muestra
- Sangre venosa anticoagulada
-Debemos obtener una suspensión de hematíes al 5% de la sangre problema de la siguiente manera:
Añadimos 0'5 ml de la sangre problema en un tubo de centrífuga y lo rellenamos con suero fisiológico.
Lo metemos en la centrífuga, y centrifugamos a 2.000rpm durante 4 minutos.
Extraemos el sobrenadante y repetimos la operación dos veces más.
Después de los tres lavados
-Añadiremos 250 microlitros de hematíes lavados en un tubo con 475 ml de suero salino y homogenizamos.--Rotulamos dos tubos limpios con las letras D y A
-En el tubo D añadimos una gota de suero anti-D y en el tubo A una gota de albúmina bovina al 30%
-A cada tubo le añadimos una gota de la suspensión de hematíes al 5% y agitamos suavemente para mezclar el contenido de los tubos.
-Centrifugamos los tubos a 1.000 rpm durante un 1 minuto.
-Después de la centrifugación observamos si ha habido aglutinación en el visualizador luminoso.
-En el tubo D añadimos una gota de suero anti-D y en el tubo A una gota de albúmina bovina al 30%
-A cada tubo le añadimos una gota de la suspensión de hematíes al 5% y agitamos suavemente para mezclar el contenido de los tubos.
-Centrifugamos los tubos a 1.000 rpm durante un 1 minuto.
-Después de la centrifugación observamos si ha habido aglutinación en el visualizador luminoso.
Observaciones
El tubo con albúmina es un control negativo, por lo que si resulta una aglutinación el resultado de la prueba no es válido. Para ver si hay aglutinación o no, se debe golpear suavemente el fondo de los tubos para despegar el botón hemático, si se resuspende es negativo y si se forman grumos de color rojo es positivo.
Resultados:
Interpretación de los resultados
Los dos tubos se han resuspendido por lo tanto el Rh de la muestra es negativo.
Hoja de trabajo
- ¿Por qué utilizamos el control de albúmina? Porque el control de albúmina es negativo y así evitamos los falsos positivo.
- ¿Qué ocurre si no aparece aglutinación en el tubo D? El Rh de la sangre problema es negativo.
- ¿Qué debemos detectar mediante un Coombs indirecto? Debemos comprobar que el paciente no posee un Du (D débil).
- ¿Cómo se prepara la muestra problema? Lavando los hematíes de la muestra problema y haciendo una suspensión de hematíes al 5%.
