DETERMINACIÓN CELULAR EN PORTA
Fundamento
Consiste en observar la aglutinación de los hematíes enfrentados a una serie de antisueros conocidos i de reconocida eficacia, para determinar el grupo ABO del individuo.
Material necesario
- Un portaobjetos o tarjeta visualizadora de fondo blanco.
- Un rotulador de vidrio.
- Una pipeta pasteur desechable.
- Palillos mezcladores.
- Un reloj.
- Suero anti-A.
- Suero anti-B.
- Sangre capilar o sangre total anticoagulada, citratada o oxalatada.
- Dividir un portaobjetos en dos secciones con el rotulador de vidrio. Marcar una con la letra A y otra con la letra B.
- Depositar una gota de suero anti-A (Azul) en la sección A del portaobjetos, y una gota del suero anti-B (amarillo) en la sección B.
- Situar una pequeña gota de sangre (aprosimadamente la mitad del volumen usado de antisuero) junto a la gota de antisuero.
- Mezclar ambas gotas en cada sección utilizando un palillo distinto en cada una de ellas y formando un circulo de 2 a 2,5 cm de diámetro.
- Hacer oscilar suavemente el portaobjetos hacia delante y hacia detrás , durante dos minutos.
- Observar la presencia o ausencia de aglutinación.
Hay aglutinación cuando aparecen unos grumos rojos que flotan en un líquido claro. En el caso contrario, los hematíes permanecen en forma de suspensión homogénea de color rojizo.
La presencia o ausencia de aglutinación puede confirmarse mediante examen microscópico de las mezclas.
En general estas pruebas son muy eficaces ya que la presencia de plasma en la muestra aumenta la velocidad de la reacción y el tamaña de los grumos. El resultado puede observarse en unos segundos, aunque conviene reexaminar la reacción del anti-A al cabo de 2 minutos para comprobar que no se ha pasado por alto ninguna reacción débil. Éstas suelen ocurrir en menos de un 1% de la muestras analizadas.
INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS
El grupo eritrocitario que se le asignarça, atendiendo a los reultados obtenidos, se puede ver en el cuadro siguiente:
Hematíes
y suero anti-A
|
Hematíes
y suero anti-B
|
Grupo
eritrocitario
|
+
|
-
|
A
|
-
|
+
|
B
|
+
|
+
|
AB
|
-
|
-
|
0
|
+ = presencia de aglutinación
- = ausencia de aglutinación
En el caso de que el grupo obtenido sea el A, los hematíes problema deberán ser ensayados de nuevo con lectina anti-A1; de forma que si se produce aglutinación, el sujeto pertenecerá al subgrupo A1.
Hoja de trabajo
- ¿Qé tipo de técnica inmunológica se emplea en este análisis?. Aglutinación.
- ¿Qué muestra utilizamos?. Sangre capilar.
- ¿Cómo se ve la aglutinación positiva?. Grumos rojos que flotan en el líquido antisuero.
- ¿Qué debemos hacer si el grupo obtenido es A?. En el caso de que el grupo obtenido sea el A, los hematíes problema deberán ser ensayados de nuevo con lectina anti-A1; de forma que si se produce aglutinación, el sujeto pertenecerá al subgrupo A1.
Valoración de los resultados
La sangre analizada es del grupo eritrocitario: A1, 0 y B.
A
A y 0
A, 0 y B
A1
Esta es la gráfica de los grupos sanguíneos en la clase
