DETERMINACIÓN CELULAR EN TUBO
Fundamento
Los hematíes de deben enfrentar a sueros conocidos que tengan anticuerpos frente a los antígenos. Por último tenemos que observar si hay aglutinación o no en los hematíes.
Materiales.
- Tubos de centrifuga
- Rotulador de vidrio
- Pipeta pasteur
- Centrífuga
- Gradilla.
Reactivos.
- Suero anti-A
- suero anti-B
- Suero anti-AB
- Solución salina fisiológico.
Muestra
- Sangre total anticoagulada.(Es preferible utilizar una suspensión de los hematíes problemas).
Procedimiento
Lo primero que realizamos es el lavado de los hematíes.
Para ello depositamos 1 ml de sangre y lo completamos con solución salina, lo agitamos y lo centrifugamos a 2000 rpm durante 4 minutos. Después desechamos el sobrenadante y volvemos a realizar el paso anterior 2 veces más.
Para ello depositamos 1 ml de sangre y lo completamos con solución salina, lo agitamos y lo centrifugamos a 2000 rpm durante 4 minutos. Después desechamos el sobrenadante y volvemos a realizar el paso anterior 2 veces más.
En la última centrifugación que realizamos desechamos el sobrenadante y preparamos hematíes al 2 %.
En un tubo depositamos 2 gotas de los hematíes lavados y 5 ml de suero fisiológico lo agitamos y así obtenemos una suspensión al 2 %.
Rotulamos 3 tubos de ensayo con las letras A, B y AB, a cada uno de estos tres tubos le depositamos una gota de suspensión de hematíes al 2 %. Luego estos tres tubos que son pequeños lo metemos dentro de otros tubos un poco más grande y al tubo A le depositamos dos gotas del suero anti-A , al tubo B le depositamos dos gotas de suero anti-B y al tubo AB le depositamos dos gotas de suero anti-AB y agitamos los tubos . Por último tapamos cada tubo con papel parafim y lo centrifugamos a 1000 rpm durante 1 minuto y observamos si hay aglutinación.
Hoja de trabajo
1. ¿Qué tipo de técnica inmunológica se emplea en este análisis ?
Determinación celular en tubo.
2. ¿A qué concentración se prepara la suspensión de hematíes problemas ?
Al 2 %
3. ¿Cómo se ve una aglutinación positiva ?
Se observa un botón de hematíes que permanecen unidos una vez desprendido el sedimento.
4. ¿A qué se debe el fenómeno de Rouleaux?
Consiste en una agrupación no específica de hematíes, que adoptan una imagen de pila de monedas.
5.¿Cómo se pueden evitar los falsos positivos ?
Con el lavado previo de los hematíes problema.
Resultado obtenido.
Se observa aglutinación en el tubo A.
Valoración de los resultados obtenidos.
La sangre ensayada es del grupo eritroitario A
