lunes, 20 de abril de 2015

TIEMPO DE TROMBOPLASTINA (TP) Práctica XLI pag 350 del libro

Tiempo de protrombina (TP) (05-03-15)

FUNDAMENTO
El tiempo de protrombina (PT), es el tiempo que tarda en coagular un PPP cuando se pone en contacto con un exceso de calcio y de tromboplastina hística.
El reactivo utilizado, para la realización de esta prueba, es una mezcla de tromboplastina hística (TH) y de calcio, por lo que recibe el nombre de tromboplastina cálcica.
La TH procede de extractos de cerebro o de pulmón, de hombre o de animales (generalmente, de conejo o de vaca).

  MUESTRA.
Plasma pobre en plaquetas (PPP), correctamente preparado.
 MATERIAL UTILIZADO.

MATERIAL
     - Tubo de ensayo de plástico.
- Gradilla.
- Cubetas de coagulómetro.
- Varilla para coagulómetro.
- Rotulador de vidrio.
- Pipeta automática de 100 µl y 200 µl.
- Coagulómetro.
- Papel  de fieltro.

REACTIVOS

  • Una tromboplastina cálcica.
La sensibilidad de todas las TH comerciales se compara con una TH de referencia internacional y se expresa en forma de un índice de Sensibilidad Internacional (ISI). Cuanto menor es el ISI de la TH comercial, mayor es su sensibilidad.
El ISI de cada reactivo de tromboplastina cálcica comercial puede ser diferente y, además, puede variar de un lote a otro. Por lo que debe de mirarse en el folleto de instrucciones que se adjunta en el envase.

REACTIVOS R
Tromboplastina calcica liofilizada, extracto de acetona dehidratada de cerebro de conejo y CaCl2.
Tampón y conservantes.
Opcional
CONTROL NORMAL REF: 1709104
CONTROL PATHOLOGIC REF: 1709106
SECUENCIACIÓN Y PROCEDIMIENTO SEGUIDO (TÉCNICA).
1.      Reconstituir los reactivos.
a.       Ref. 1709222-1709224-1709225 Reactivo de trabajo (RT): Reconstituir el contenido de un vial R con 4,0 ml de agua destilada.
b.      Ref. 1709223. Reactivo de trabajo (RT): Reconstituir el contenido de un vial R con 2,0 ml de agua destilada.
c.    Tapar el vial y mezclar suavemente hasta disolver su contenido. Evitar la formación de espuma. Incubar 15 min. a temperatura ambiente, antes de su uso.
2.       Depositar el volumen total de la tromboplastina cálcica, que es necesaria, en un tubo de ensayo rotulado correctamente.
3.      Atemperar la tromboplastina cálcica a 37º C durante 5 minutos.
4.      Rotular las cubetas con las letras M y C.
5.      Verter 100 µl de PPP problema en el interior de la cubeta y atemperar a 37º C.
6.      Colocar la cubeta en la celda de medida del coagulómetro y agregar 200 µl de tromboplastina cálcica.
7.      Automáticamente, se pone en marcha el magnetoagitador del coagulómetro y comienza la lectura de éste.
Cuando se forma el coágulo, el coagulómetro finaliza la lectura y nos ofrece en su pantalla el tiempo transcurrido desde la adición de la tromboplastina cálcica.

 DESCRIPCIÓN Y REGISTRO DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS CON EVALUACIÓN PERSONAL DEL ALUMNO DE LOS MISMO RESULTADOS.
El TP es el tiempo transcurrido desde la adición de la tromboplastina cálcica hasta la formación del coágulo de fibrina.
El resultado también puede expresarse en forma de porcentaje de actividad de la protrombina. Para ello, el valor en segundos del TP determinado en la muestra se interpola en la curva de actividad de la protrombina, previamente preparada, y se halla el porcentaje de actividad de la protrombina que le corresponde a éste.
Además, el resultado puede expresarse en forma de cociente o proporción (ratio) entre el valor, en segundos, del TP de la muestra y el de un plasma control no diluido ( el de 100% de actividad)
Este cociente puede ser corregido con el ISI de la tromboplastina hística, en este caso se denomina INR y se calcula con la siguiente fórmula:

Los valores de TP están comprendidos, normalmente, entre 11 y los 15 segundos.
El porcentaje de actividad de la protrombina de un plasma normal oscila, habitualmente, entre el 70 y el 100%.
La ratio de protrombina normal está comprendida entre 0,9 y 1,15.
El tiempo de protrombina está alargado, el porcentaje de actividad de la protrombina está disminuido y la ratio de protrombina está aumentada, en pacientes:
·         Con déficits de factores de la vía intrínseca.
·         Sometidos a terapias con dicumarinas.
·         Con algún trastorno hepático.
Los valores que se han obtenido con la práctica son:


Segundos
Porcentaje
Ratio
I
Muestra
24,9 sg
33,2 %
2,02
2,31
Control
16,8 sg
59 %
1,37
1,45


Este resultado lo interpolamos a la tabla y nos da un valor de un porcentaje al 50 % y 19 seg, por lo que el resultado, según los valores normales, está alargado, por lo que la muestra puede pertenecer a algún paciente con alguna de las patologías antes descritas.






 OBSERVACIONES, COMENTARIOS Y CONCLUSIONES.
Los factores extrínsecos de la coagulación se activan en presencia de tromboplastina cálcica en plasma citratado. El proceso de medición del tiempo de protrombina en una etapa única, mide el tiempo de coagulación del plasma después de la adición del reactivo.
El Tiempo de Protrombina (PT) o Tiempo de Quick sirve para determinar trastornos de la coagulación, la PT es la determinación más frecuente junto con la APTT.
La PT es sensible a las anomalías de los factores extrínsecos de la coagulación (Factor II, V, VII, X y fibrinógeno), así como sus inhibidores. Es, además, un indicador de enfermedades hepáticas.
La muestra ensayada tiene un tp normal.

Hoja de trabajo


1º ¿Qué índice expresa la sensibilidad de una tromboplastina hística?
Se expresa con el ISI (Índice de Sensibilidad Internacional). Cuanto menor es el ISI de la TH comercial, más sensible es.

2º ¿Cómo se llama la ratio de protrombina corregida?

Se llama INR.

3º ¿Cuál es el % normal de actividad de protrombina?
El % normal de actividad de protrombina está entre el 70 y 100%
4º. ¿En qué circunstancias se altera el TP?
Se altera en pacientes:
·         Con déficits de factores de la vía intrínseca.
·         Sometidos a terapias con dicumarinas.
·         Con algún trastorno hepático.