DETERMINACIÓN DEL VALOR DEL HEMATOCRITO MEDIANTE EL MICROMÉTODO
INTRODUCCIÓN
Cuando se centrifuga la sangre, la fracción forme, que contiene los hematíes, se agrupan en el fondo del tubo y el plasma queda de forma de sobrenadante.
El vakir hematocrito, o simplemente hematocrito (HTO o HTC o HCT) es la relación existente entre el volumen ocupado por los hematíes y el ocupado por la sangre total, exp`resada en forma de porcentaje.
Este valor no es exactamente igual en todas las zonas vasculares del organismo. Así pues, el HCT obtenido con sangre capilar es algo superior al logrado a partir de sangre venosa.
METODICA
Fundamento
El HCT puede determinarse por métodos manuales o por métodos automáticos.
Los métodos manuales consisten en la centrifugación de la sangre, aplicándola una fuerza de 2000 a 5000 g (macrométodo) o de 12000 a 15000 g (micrométodo).
Los método automáticos pueden basarse en 2 principios:
- El cálculo matemático del HCT a partir de los valores RBC y de volumen copurcular medio, obtenidos electrónicamente con anterioridad.
- El análisis de la sombra que produce la población eritrocitaria, al reflejarse en un campo oscuro.
Con los métodos manuales también se cuentan, junto con el volumen de los hematíes, el de los leucocitos, el de las plaquetas y el del plasma que queda atrapado entre los hematíes. Por ello, el valor de HCT conseguido con métodos automáticos es más exacto y suele ser 1 o 2 unidades más bajo que el logrado por métodos manuales.
Material necesario:
- Tubos capilares de vidrio 7 a 7,5 cm de longitud y 1 mm de diámetro interno. No están graduados y son desechables.
Si la muestra es sangre capilar, éstos han de estar heparinizados interiormente; mientras que si la muestra es sangre venosa y ha sido adecuadamente anticoagulada, pueden no estar heparinizados. Los heparinizados tienen una franja roja en uno de sus extremos.
- Plastilina.
- Algodón o gasas.
- Una centrífuga de microhematocrito. Ëstta consta de una especie de plato horizontal con unos surcos para colocar los capilares, y permite apligar una fuerza centrífuga de 12000 a 15000g durante un tiempo controlado automáticamente.
- Una regla milimetrada o un lector de microhematocrito.
Reactivos
- EDTA tripotásico dispuesto en tubos.
Muestra
- Sangre capilar o venosa. Esta última debe ser recogida en tubos con EDTA tripotásico.
Si se utiliza sangre capilar, se ha de desechar la primera gota obtenida tras la punción. Si se emplea sangre venosa, se deberá homogeneizar perfectamente antes de su uso.
Técnica
- La determinación ha de hacerse por duplicado.
- Llenar cada tubo capilar con sangre, hasta las 3/4 partes de su longitud. El llenado se efectúa por capilaridad y se realiza poniendo en contacto uno de los extremos del tubo capilar con la gota de sangre de sangre, o introducciéndolo en el tubo de sangre e inclinando éste, posteriormente, para facilitar el proceso.
- Limpiar el exterior de cada tuvo con un trozo de algodón o con una gasa.
- Sellar el extremo de cada tubo por el que ha entrado la sangre con plastilina. Para ello, se hace penetrar el tubo en la plastilina, o incluso se atraviesa ésta con aquél.
- Colocar, debidamente equilibrados, los tubos en la centrífuga. En ella los tubos se sitúan con su extremo tapado hacia fuera, ajustados al borde exterior y adecuadamente encajados en sus surcos.
- Centrifugar los tubos a unas 12000 g durante 5 minutos.
Lectura de resultados
Puede realizarse de 2 maneras:
- Midiendo las columnas formadas en el interior de cada tubo con una simple regla milimetrada y calculando, segidamente, el porcentaje que le corresponde a la columna de eritrocitos, mediante una sencilla regla de tres.
- Mediante un lector de microhematocrito.
Entre los valores obtenidos con los dos tubos no debe haber una diferencia superior al 2% del mayor de ellos . Si esta diferencia es superior al 2% se repite la determinación, y si es inferior, se da como valor final del HCT a la media de ambos valores.
Si el valor final de HCT es superior a 50, se repite la determinación, pero alargando la centrifugación a 10 minutos.
INTERPRETACIÓN CLINICA DE LOS RESULTADOS OBTENIDOS.
El valor normal del HCT está comprendido entre el 42 y el 47% en las mujeres, y entre el 45 y el 52% en los varones.
Un valor bajo del HCT suele ser signo del padecimiento de una anemia. Sin embargo, hay falsos descensos del HCT ocasionados por hemodilución ( por ejemplo, el de la hidremía del embarazo).
Paradojicamente, el HCT suele ser normal en la fase más temprana de las hemorragias agudas, pues en éstas se pierden células y plasma en la misma proporción.
Un valor alto del HCT suele ser signo del padecimiento de una poliglobulina. Sin embargo, también hay engañosos ascensos del HCT producidos por hemoconcentración (por ejemplo, el de la deshidratación).
HOJA DE TRABAJO
1. ¿Qué significa la franja roja que tienen algunos capilares de microhematocrito?
Que llevan EDTA tripotásico.
2. ¿A qué fuerza relativa de centrifugación (g) se centrifuga la sangre?
A 12000 g durante 5 minutos.
3. Si la medida de la columna de eritrocitos es de 20 mm y la de la columna total es de 50 mm, ¿Cuál es el valor del hematocrito?.
El HCT seria del 40%.
4. Si con un capilar se obtiene un HCT de 45 y con el otro uno de 43, ¿Cómo debe de ser la forma de actuar ante estos resultados?.
Hay justo 2% se podria dar por bueno, o para afianzarse repetir la prueba.
Resultados obtenidos:
E T HCT-RM HCT-L
Primer tubo 19 46 41,30 41,30
Segundo tubo 19 45 42,22 42,22
T = 46 mm
E = 19 mm
T 2= 45 mm
Si T¬¬¬100%
E¬¬¬HCT
E x 100 19 x 100 19 x 100
HCT=¬¬¬¬¬¬¬ = ¬¬¬¬¬¬¬ = 41,30 % HCT 2 = ¬¬¬¬¬¬¬ = 42,22%
T 46 45
Medidas con un lector de microhematocrito
T= 46
E= 19
T 2=45
Si T¬¬¬100%
E¬¬¬HCT
E x 100 19 x 100 19 x 100
HCT=¬¬¬¬¬¬¬ = ¬¬¬¬¬¬¬ = 41,30 % HCT 2 = ¬¬¬¬¬¬¬ = 42,22%
T 46 45
Valor final en las dos mediciones:
HCT + HCT 2 41,30 + 42,22
HCT final = ¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬ = ¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬¬ = 41,76%
2 2
- 2% del valor mayor de HCT: no es menor.
- Diferencia entre ambos valores de HCT: 0.92%.
- ¿Son válidos los resultados obtenidos? Estarían por debajo del porcentaje para hombres que esta comprendido entre 45 y 52%.
- En el caso positivo, ¿Cuál es el valor final de la determinación? Sería como valor final, la media de las dos medidas obtenidas con los dos capilares, que en este caso sería del 41,76%.
Valoración de los resultados.
- ¿ha de prolongarse la centrifugación hasta 10 minutos? No, ha sido suficiente.
- El valor final de la determinación indica que el HCT es: Bajo.
